Die Säure FAST FLECK
Die Säure FAST FLECK
Bestimmte Bakterienarten haben ungewöhnliche Lipide (Mykolsäure) in ihren Zellwänden. Diese Substanz macht die Zellwand sehr wachsartig und undurchdringlich durch wässrige Lösungen stain.
Im späten 19. Jahrhundert, Koch und Ehrlich eingeführt gleichzeitig ein Verfahren zum Färben des zuvor nicht nachweisbar Mycobacterium tuberculosis. Modifikationen von Ziehl Neelsen und erzeugen die üblicherweise verwendete Karbolfuchsin Lösung, die in den Fleck fahren erfordert Dämpfe. (Der Schmelzpunkt für Mycolsäure beträgt 56 o C). Muller und Chermock modifizierten Karbolfuchsin zur Verwendung bei Raumtemperatur durch Zugabe eines Tensids (Benetzungsmittel). Eine Lösung von Säure-Alkohol entfernt Fleck von den meisten Zell- und Gewebeelementen. Die Mycolsäure jedoch Resists durch diese Differenzierungsmittel penetration, säurefeste Bakterien Rot gegen einen farblosen Hintergrund verlassen. Hellgrün oder Methylenblau als Gegenfärbemittel verwendet, in der Lokalisierung von Zellmaterial auf der Probe zu unterstützen. Die Säure schnell Fleck ist für vorläufige Diagnose von aktiver Tuberkulose routinemäßig auf Sputum-Proben verwendet.
Machen Sie einen dünnen bakteriellen Abstrich auf einem separaten Schlitten für jeden Organismus zur Verfügung gestellt. Sie werden vor allem die M. smeg arbeiten müssen. mit der Schleife. Es wird hilfreich sein, eine Öse voll Wasser hinzuzufügen. Machen eines durch Hinzufügen einer Schleife von sowohl einer Mischprobe gleiten. NICHT VERGESSEN zu WÄRME-FIX!
Wenn Sie Substanz auf der Schleife oder Gleitfläche sehen können, wird Ihr Abstrich zu dick sein. Die Flecken können nicht durchdringen oder von dicken Proben M. smeg auszuspülen. verzweigt „höher“ Bakterien; die Zellen sind schwierig zu trennen.
Fluten der Schlitten mit Karbolfuchsin (3-4 Tropfen) und über einen dampfenden Wasserbad für 5 Minuten, Zugabe von stain als die Ränder zu verdampfen beginnen. Versuchen Sie nicht, Fleck in das kochende Wasser zu tropfen. Ein Cent großes Stück Papiertuch kann direkt auf dem Abstrich platziert helfen, den Farbstoff auf dem Abstrich zu halten.
Entfernen Sie aus dem Bad und cool. Spülen Sie mit destilliertem Wasser und tupfen Sie vorsichtig mit saugfähigem Papier. Lassen Sie die Folie zu kühlen.
Spülen Sie Papiertuch in den Ausguss und holen am Ende der Klasse bis
Entfernen des überschüssigen Satin von den Schiebe Kippen und tropfte säure Alkohol über sie für 30 Sekunden.
Dieser Pre-Einfärben Schritt stoppt die Wirkung von Karbolfuchsin und entfernt überschüssigem Fleck.
Spülen Sie mit destilliertem Wasser und sanft abgetupft.
Abspülen stoppt die Farbstoffwirkung, Blotting von verdünnt den nächsten Schritt hält. Zu viel Druck in Blotting wird die Folie brechen.
Differenzieren Organismen durch den Schieber mit einer Säure-Alkohol-Überflutungen und damit für zwei Minuten stehen.
Spülen Sie mit destilliertem Wasser und sanft abgetupft.
Die Spülung stoppt die Wirkung der Säure-Alkohol.
Fluten den Schieber mit Methylenblau für mindestens eine Minute.
M. luteus ist ein nicht-AF coccus in Pakete,
M. smeg. AF + ist, und sind winzig, verzweigte Stäbe.
Spülen und trocken tupfen. Beobachten.