Kalibrierkurven, Teil I nach B oder nicht b, LCGC
Die meisten LC-Methoden werden für die quantitative Analyse verwendet - das heißt, die Methoden, die die „wie viel ist es?“ Beantworten Frage. Fast verlassen alle diese Verfahren auf dem Vergleich der Peakfläche (oder weniger häufig, Peakhöhe) eine Probe mit dem einem Referenz-Standard. Dazu verwenden wir eine Kalibrierungskurve (auch als Standardkurve oder manchmal auch als „Linie“ bezeichnet). Die beiden beliebtesten Methoden der Kalibrierung sind externe und interne Standardisierung. In externe Standardisierung wird die Kalibrierung auf einen Vergleich der Antwort des Referenzstandards mit seiner Konzentration basiert. Zur internen Standardisierung, eine konstante Konzentration eines internen Standards wird zu jeder Probe und das Verhältnis der Reaktion des Analyten zu der des internen Standards hinzugefügt wird, mit der Konzentration verglichen. Die externe Standardmethode ist einfacher und wird für alle hier diskutierten Beispiele verwendet werden; die Einzelheiten dieser beiden Methoden werden in einem späteren Artikel erörtert werden.
Es gibt verschiedene Möglichkeiten, um eine Kalibrierungskurve zu verwenden, Proben zu quantifizieren. Da UV-Detektion für die meisten LC-Methoden verwendet wird, und die UV-Detektor Antwort vs. Spitzenbereiches ist linear über fünf oder mehr Größenordnung können wir lineare Reaktion ist möglich annehmen, wenn eine Methode Kalibrierung verwenden, das einen weiten Konzentrationsbereich abdeckt. Einige andere Nachweismethoden, beispielsweise Massenspektrometrie (MS) oder Verdampfungslichtstreuungsdetektion (ELSD) haben schmalere lineare Bereiche, so dass eine lineare Kalibrierung nicht geeignet sein könnte. Wenn ein UV-Detektor verwendet wird, gehen wir davon aus, dass die gut erzogene Eichkurve linear sein wird. Linearität ist definiert als
wobei y die Antwort (Bereich) ist, x die Konzentration ist, m die Steigung der Kurve ist und b der y -intercept. (Auch wenn die Beziehung linear ist, nennen wir es noch eine Kurve.) Wenn die Kurve geht durch den Ursprung (x = 0, y = 0), b = 0, und die Kurve kann wie folgt ausgedrückt werden
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