Wie gießen Agarplatten in einem Pinch - Bitesize Bio
Wir haben bereits abgedeckt, wie die perfekte Agar-Platte jedes Mal zu machen. Dieser Artikel ist ein großer, detaillierter Ansatz für die drei grundlegenden Schritte:
- Machen Sie das Agar
- Gießen Sie die Agar
- Trocknen Sie die Platte
Dieser Prozess gibt Ihnen sterile Agar-Platten. Aber manchmal brauchen Sie nicht völlig steril Platten. Manchmal ist der Autoklav voll und Sie brauchen nur ein paar. Wenn ja, dann können einige Änderungen am Protokoll vorgenommen werden.
Hier ist eine kurze Liste von Möglichkeiten für Ihre Platte Bedürfnisse zu gießen. Zunächst werde ich die richtige Art und Weise zu gießen sterile Platten überprüfen. Ich werde Ihnen dann sagen, was zu tun ist, wenn man unter weniger Bedingungen arbeiten.
Vollständig Sterile Agarplatten
- Messen Sie Ihre Agar und Brühe und in einem sauberen Erlenmeyerkolben, der zweimal das Volumen des Agar messen Sie machen. Also, wenn Sie 200 ml machen, verwenden Sie einen 400-ml-Kolben.
- Fügen Sie die gewünschte Wassermenge in den Kolben einen skalierten Zylinder verwendet wird.
- Wenn Sie es haben, setzen Sie ein Magnetrührstab in den Kolben.
- Legen Sie Folie über die Oberseite des Kolbens.
- Legen Autoklav Band auf der Folie.
- Autoklav für 25 Minuten.
- Den Kolben mit Autoklav-Handschuhe. Wenn Sie einen Rührstab verwenden, der Kolben wird auf einer Rührplatte und vorsichtig umrühren.
- Bereiten Strömungshaube und die Platten unter Verwendung einer sterilen Technik.
- Sobald der Kolben bei Raumtemperatur ist, oder nahe daran, fügen alle gewünschten Antibiotika und zur Strömungshaube bewegen.
- Unter Verwendung eines sterile Technik hebt den Deckel der oberen Platte in einem Winkel und sanft die gewünschten Volumen gießen. Verschließen Sie die Platte, heben Sie sie, und legen Sie sanft in den Rücken der Strömungshaube links, wodurch Reihen von verkappten Platten, wie Sie gehen.
- Lassen Sie die Platten im laminaren Strömungshaube trocknen, dann entweder einzeln jeweils mit Parafilm oder in sterilen Beuteln schließen. Lagerung bei 4 ° C.
Nicht dampfgehärtetem Plates
Lassen Sie uns sagen, dass Ihre Autoklaven Pausen und Sie müssen Agarplatten in einem Blitz. Nach dem von Labor zu Labor gehen, Betteln für Platten und kommen kurz gesagt, du bist immer noch in einer Bindung. Anstatt Autoklaven, können Sie Ihre gewünschte Masse von Agar auszumessen, stecken es in einen trockenen Erlenmeyerkolben, fügen Sie Ihr Wasser und Mikrowelle es für 2-4 Minuten, je nach Volumen. Stellen Sie sicher, dass Sie die Mikrowelle stoppen gelegentlich Überlauf zu verhindern.
Sobald die Flüssigkeit klar und voll sprudelnden ist, nehmen Sie es aus der Mikrowelle und gießen Sie Ihre Platten, sobald die Lösung kühl genug ist.
Wird diese steril sein? Nein. Wenn Sie eine sterile Platte benötigen, sollten Sie dies tun? Nein.
Autoklavierte Platten gegossen auf dem Tisch
Lassen Sie uns sagen, dass Ihre Laminarströmungsabzug bricht, oder ganz voll ist. Sie haben bereits Ihre Medien autoklaviert, ist es bereit, zu gießen. Wie geht's? Unter diesen Umständen können Sie Platten auf Ihrer Tischplatte gießen.
Erstens, Reinigen Sie Ihren Bereich sterile Technik, als würden Sie eine Laminarströmungsabzug. Wischen Sie die Bank mit Ethanol nach unten. Öffnen Sie die Tasche von Petrischalen in einer sterilen Art und Weise. Ich öffne an der Klappe sagen „hier öffnen“, drehen Sie den Beutel den Kopf auf der Bank, und nehmen Sie langsam die Tasche aus dem Turm der ungeöffneten Petrischalen. Teilen Sie den Turm in zwei Hälften.
Im Interesse des Versuchs als „steril“ wie möglich zu sein, gießt von der Bodenplatte nach oben. Dazu hebt die Platte Deckel leicht aus der untersten Platte (anschließend den gesamten Turms mit anheben), gießen gewünschte Volumen, und dann den Deckel nach unten. Wiederholen Sie für die nächste unterste Platte. Wenn Sie jede Platte im Turm gefüllt haben, lassen Sie den Turm zu trocknen. Innerhalb einer Stunde werden die Platten gesetzt, aber der Turm über Nacht verlassen von den meisten der Kondensation loszuwerden. Diese können in einem sterilen Beutel gelagert werden oder einzeln geschlossen mit Parafilm Streife bei 4 ° C.
Werden diese Platten vollständig steril sein? Nein. Wenn Sie eine sterile Platte benötigen, sollten Sie dies tun? Nein.
Die Art und Weise Sie gehen über Ihre Platten gießt, liegt ganz bei Ihnen und Ihren Bedürfnissen an! Genau wie es mehr als einen Weg, um einen Boden zu wischen, gibt es mehr als einen Weg, um jeden Schritt der Platte Gießprozess zu tun. Überlegen Sie, warum Sie die Platte brauchen, was Sie es benötigen, um Ihre Situation zu funktionell zu tun, und gehen von dort aus.