Making up Nährböden, Nuffield Foundation
Die Fähigkeit, unterschiedliche Kulturmedium zu machen für verschiedene Kultivierung von Mikroorganismen ist ein wesentlicher Bestandteil jeder Mikrobiologie Untersuchung.
Agar stellt eine Matrix von im Wasser gelösten Nährstoffen jelly unterstützen. Verschiedene Nährstoffe sind für unterschiedliche Kultivierung von Mikroorganismen.
Geräte und Chemikalien
In verschiedenen Nährstoffe in die Grund Agar in Abhängigkeit von den Organismen Sie Kultur planen.
Gesundheit - Sicherheit und Technische Hinweise
Siehe CLEAPSS Rezeptkarte 1 für vollständige Informationen über Handhabung Agar. Die identifizierte Gefahr betrifft das Pulver inhaliert, wenn das Agargel bilden - die Kontrollmaßnahme wird das Pulver in einem Abzug Auswiegen. Die Gefahr von Verbrühungen, wenn sie mit heißer Flüssigkeit zu tun ist durch das Tragen von Ofenhandschuh reduziert.
2 Nähragar für Bakterien Mix 2 g Bovril, 0,5 g Natriumchlorid und 1,5 g Agar mit 10 cm 3 Wasser zu einer Paste. Langsam fügen Sie mehr Wasser unter Rühren, bis das Volumen auf 95 ° C in der erforderlichen Behälter 100 cm 3. Erhitzen in einem siedenden Wasserbad ist.
3 Malz-Agar für Pilze Mix 2 g Malzextrakt mit 2 g Agar mit 10 cm 3 Wasser zu einer Paste. Langsam mehr Wasser unter Rühren hinzufügen, bis das Volumen auf 95 ° C in dem erforderlichen Behälter 100 cm 3.e Erhitzen in einem siedenden Wasserbad ist.
Stärke-Agar 4 Eine Paste 1 g löslicher Stärke in 10 cm 3 heißen Wasser enthält. In 1,5 g Agar, gut umrühren und langsam mehr Wasser unter Rühren hinzufügen, bis das Volumen beträgt 100 cm 3.e Erhitzen in einem siedenden Wasserbad auf 95 ° C in den erforderlichen Containern.
6 Mannitol Hefeextrakt-Agar (MYEA) für 1 Liter Mannit-Hefeextrakt-Agar (MYEA) 10 g Agar in 1 Liter Wasser suspendiert. Wärme aufzulösen. Mit 0,5 g K2 HPO4 (Hazcard 95C), 0,2 g MgSO4 .7 H2 O (Hazcard 59B), 0,2 g NaCl (Hazcard 47B), 0,2 g CaCl2 .6H2 O (Hazcard 19A), 10 g Mannit und 0,4 g Hefeextrakt . K 2 HPO 4. MgSO4 .7 H2 O und NaCl werden als geringe Gefahr beschrieben. CaCl2 .6H2 O ist ein Reizmittel als Pulver, aber nicht in dem Endmedium.
7 Stickstofffreie Mineralsalze-Agar für 500 cm 3 zuerst 0,05 g FeCl3 .6H2 O in 500 cm 3 destilliertem Wasser auflösen. 2 g K 2 HPO 4. 0,25 g MgSO4 .7H2 O und 10 g Glukose. Auflösen und pH-Wert überprüfen, auf 8,3 eingestellt notwendig, wenn mit 0,1 M NaOH (Siehe CLEAPSS Hazcard 91: Reizend bei dieser Konzentration). Gießen in eine Flasche, die 1 g CaCO3 und 7,5 g Agar. Autoklaven bei 121 ° C. Mischen, um die CaCO3 zu zerstreuen vor dem Gießen. Sie können stickstofffreie fertigen Mineralsalze-Agar kaufen. K 2 HPO 4 (Hazcard 95C), MgSO4 .7H2 O (Hazcard 59B), Glucose (Hazcard 40C) und CaCO3 (Hazcard 19B) sind alle als Low Gefahr aufgeführt. FeCl3 .6H2 O ist schädlich, als Feststoff, aber nicht bei der niedrigen Konzentration des endgültigen Agar.
CLEAPSS Laboratory Handbuch Abschnitt 15.2.7 hat mehr Informationen darüber, wie Agar zu verwalten und Platten herzustellen. Oder Sie können in Flaschen oder Platten vorbereitet Medien kaufen (siehe Lieferanten unten).
ein Berechnen der Menge erforderlich, und gerade genug Agar zur Untersuchung vorzubereiten - ca. 15 cm 3 für die normale Tiefe in einer 90 mm Petrischale. Ein allfälliger Überschuss wird halten für 6-12 Monate in fest verschlossenen Schraubdeckel-Flaschen wenn steril.
b abwiegen das Agarmedium Pulver, das Gel und ausgewählte Nährstoffe, Wasser hinzufügen und die Mischung für die Zeit, sterilisieren, und bei der Temperatur, die vom Hersteller angegeben.
C Wärme Agar und Wasser bei 95 ° C, um den Agar aufzulösen. Verwenden Sie immer ein Wasserbad Agar zum Kochen bringen, und fügen Sie nie Agar Wasser zum Sieden.
d Stopper-Kolben mit einem gut sitzenden Stecker nicht-absorbierender Watte. Deckel mit Backpapier oder Aluminiumfolie vor durch Autoklavierung sterilisiert wird.
e Nach dem Autoklavieren Übertragung auf einem Wasserbad bei 50 ° C äquilibrieren. Stack-Platten nach außer in der oberen Platte zu minimieren Kondensation Gießen (n).
f Wärmen Sie die Petrischalen vor dem Gießen Kondensation zu minimieren.
Halten g gegossen Platten in einem verschlossenen Plastikbeutel bis die Dehydratation der Medien zu reduzieren, benötigt.
h Teilen Sie die Agar in einzelne sterile McCartney-Flaschen, wenn Sie die Studenten wollen ihre eigenen Platten gießen (siehe Gießen eine Agar-Platte).
Mikrobiologie Lehrer Ressourcen
Gesellschaft für Allgemeine Mikrobiologie - Quelle für Grund Praktischer Mikrobiologie, ein hervorragendes Handbuch von Labortechniken und Praktischer Mikrobiologie für Sekundarschulen, eine Auswahl an bewährten Übungen unter Verwendung von Mikroorganismen.